【引物100um怎么稀释到10um】在分子生物学实验中,引物的浓度控制非常重要。当需要将已有的100 μM 引物稀释至10 μM 时,可以通过简单的稀释方法实现。以下是具体的步骤和计算方式。
一、总结
要将100 μM 的引物稀释至10 μM,需使用一定的稀释比例。根据浓度与体积的关系公式:
$$
C_1 \times V_1 = C_2 \times V_2
$$
其中:
- $ C_1 $ 是初始浓度(100 μM)
- $ V_1 $ 是初始体积
- $ C_2 $ 是目标浓度(10 μM)
- $ V_2 $ 是最终体积
通过计算可得出所需稀释倍数为10倍。即,取1份原液,加入9份稀释液,总体积为10份。
二、操作步骤
1. 确定所需终体积:根据实验需求,决定最终需要多少体积的10 μM 引物溶液。
2. 计算所需原液体积:用终体积除以10,得到所需100 μM 引物的体积。
3. 加适量稀释液:将计算出的原液体积加入到对应的稀释液中,充分混匀。
三、示例表格
初始浓度(C₁) | 目标浓度(C₂) | 稀释倍数 | 原液体积(V₁) | 稀释液体积(V₂ - V₁) | 总体积(V₂) |
100 μM | 10 μM | 10倍 | 1 mL | 9 mL | 10 mL |
100 μM | 10 μM | 10倍 | 500 μL | 4.5 mL | 5 mL |
100 μM | 10 μM | 10倍 | 200 μL | 1.8 mL | 2 mL |
100 μM | 10 μM | 10倍 | 100 μL | 900 μL | 1 mL |
四、注意事项
- 使用无菌水或适当的缓冲液进行稀释,避免引入杂质。
- 混匀后建议短暂离心,确保溶液均匀。
- 若多次使用,可分装保存于-20℃,避免反复冻融。
通过以上方法,可以快速、准确地将100 μM 引物稀释至10 μM,适用于PCR等常规实验操作。